Сифилис
Страница 47

Иммуноферментный анализ.

Метод иммуноферментного анализа (ИФА, The enzymelinked immunosorbent Assay, Elisa) широко используется для диагностики сифилиса. Принцип реакции заключается в соединении сифилити­ческого антигена, сорбированного на поверхности твердофазного носителя, с антителом испытуемой сыворотки крови и выявления специфического комплекса антиген – антитело с помощью анти­видовой иммунной сыворотки, меченной ферментом. Взаимодей­ствие фермента с субстратом дает цветную реакцию, интенсивность которой зависит от количества связанных сывороточных антител.

В нашей стране методика постановки ИФА для серодиагностики сифилиса с отечественными ингредиентами разработана в отделе микробиологии ЦНИКВИ. При исследовании 1609 образцов сыво­ротки крови и спинномозговой жидкости выявлена чувствитель­ность, составившая 95,2%, и высокая специфичность. Отрицатель­ные результаты ИФА у полноценно леченных больных сифилисом могут служить критерием излечения (Дмитриев Г.А.). При автомати­зированном учете результатов эта реакция используется для профи­лактического освидетельствования на сифилис больших групп об­следуемых: доноров, беременных и др.

Тест для выявления IgG (Captia Syphilis G test) – тест-ловушка использует в качестве антигена очищенные патогенные трепонемы. У больных с вторичным, ранним и поздним сифилисом и нейроси-филисом и у реинфицированных пациентов чувствительность теста 100%. Тот же принцип ловушки для антител применен с целью определения сывороточных IgM (Дмитриев Г.А., Брагина Е.Е.).

Метод иммуноблоттинга.

При проведении иммуноблоттинга трепонемы подвергаются элек­трофорезу с разделением белковых иммунодерминант на нитроцеллюлозе. Затем производится обработка разделенных точек исследуе­мой сыворотки и антителами к IgG либо IgM, меченными фермен­тами или радиоактивными веществами.

lgM-серология.

При изучении антителообразования в организме больных сифи­лисом установлено, что первыми после заражения вырабатываются специфические IgM, выявляемые уже на 2-й нед после заражения и достигающие максимальной концентрации в крови на 6-9 нед. Че­рез 6 мес после окончания терапии у большинства больных в крови они не определяются, На 4-й нед после инфицирования организм начинает продуцировать в достаточной степени специфические IgG. Этот вид иммуноглобулинов в наибольшем количестве определяет­ся через 1 –2 года после заражения. Заслуживает особого внимания то, что специфические IgM перестают вырабатываться при исчезно­вении из организма антигена, а секреция IgG продолжается клона­ми клеток памяти. Кроме того, крупные молекулы IgM не проходят через плаценту от матери к плоду, в связи с чем по их наличию у ребенка судят об его инфицировании бледной трепонемой.

Ввиду того, что концентрация в крови специфических IgM за­кономерно снижается после эффективного лечения, рост титра этих антител может служить вспомогательным признаком наличия реци­дива заболевания или реинфекции (В.Н.Беднова). В 1997 г. предло­жена реакция 19S IcM-FTA-ABS, а затем 19S IgM-TPHA. В основе этих тестов лежит разделение с помощью гельфильтрации испыту­емых сывороток на 19S IgM и 7IgG и выявление первых с помо­щью иммунофлюоресцентного метода и теста гемагглютгинации. Затем была предложена реакция гемадсорбции на твердофазном носителе IgM-SPHA, объединяющая элементы постановки ИФА и РПГА, а также 19SIM-SPHAH IgM-TP-ABS-ELISA. IgM-SPHA-тест наибо­лее пригоден для характеристики сифилитического процесса и в ЦНС в частности, а также отличия рецидива заболевания от реин­фекции.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Метод заключается в многократном увеличении (амплификации) количества ДНК выявляемого микроорганизма. Разработка вариан­тов ПЦР для диагностики сифилиса обусловлена недостаточностью стандартных тестов при раннем серонегативном, врожденном сифи­лисе и нейросифилисе. ПЦР является превосходным методом для диагностики сифилиса при небольшом количестве трепонем в исследуемом материале. Большим достоинством ПЦР является воз­можность автоматизации реакции путем заданного циклического температурного режима для определяемой за счет меченных праймеров цветной реакции. Остается невыясненным вопрос – отражает ли наличие трепонемной ДНК присутствие жизнеспособных трепо-нем или это могут быть остатки погибших микроорганизмов, со­держащие способную к амплификации ДНК.

Применение ПЦР может иметь большое значение при диагнос­тике врожденного сифилиса (пассивный трансплацентарный пере­нос антител не влияет на результаты теста), нейросифилиса, пер­вичного серонегативного сифилиса (в настоящее время единствен­ным критерием является прямое микроскопическое обнаружение трепонем), а также у больных, у которых диагностика сифилиса с помощью обычных серологических реакций затруднена из-за ин-фицирования ВИЧ (Дмитриев Г.А., Брагина Е.Е.).

Страницы: 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52

Смотрите также

Бухгалтерский учет финансовых активов (денежных средств). Порядок учета наличных денежных средств и кассовых операций (1-й ур.)
Нормативная базаОрганизация ведения кассовых операцийРасчеты наличными денежными средствами осуществляются через кассу и возлагается на кассира. Касса должна быть укреплена в соответствии с утвержд ...

Мочетерапия в конкретных случаях
Так как состав мочи зависит от патологического состояния человека, применение мочи показано при всех заболеваниях, за исключением травматизма или заболеваний, имеющих механическую природу. Это обс ...

Любому движению нужна энергия
Вся Вселенная находится в бесконечном движении. Появляются одни звёзды, и исчезают другие. Рождаются планеты. На них сыплются метеоритные дожди. Случаются грозы, и после дождя появляются радуги. Н ...

 
Copyright © 2010 www.medicus-amicus.ru. All Rights Reserved.